TH-Q320非洲豬瘟檢測儀是【天合環(huán)境】根據(jù)市場需求研發(fā)的實(shí)時(shí)檢測反應(yīng)的儀器，主要由基因擴(kuò)增熱循環(huán)組件、微量熒光檢測光學(xué)系統(tǒng)、微電路控制系統(tǒng)、計(jì)算機(jī)及應(yīng)用軟件組成。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

1.體積小，重量輕

整機(jī)外尺寸：寬*深*高：235×385×175mm，總重量僅5.7kg

2.升降溫速率

采用Marlow公司PCR專用大功率半導(dǎo)體制冷片，在保證100000次循環(huán)的壽命條件下，為模塊提供更高的升降溫速率

3.控溫精度

采用全新的控溫算法為模塊控溫提供更高的控制精度和準(zhǔn)確度

4.溫度均勻性

全新設(shè)計(jì)的加熱體，模擬加熱體結(jié)構(gòu)熱量分布，為模塊提供更好的溫度均勻性

5.高激發(fā)效率

采用CREE公司的高亮度長壽命LED作為激發(fā)光源，以低損耗玻璃光纖作為傳導(dǎo)介質(zhì)，為試劑提供更高的激發(fā)光能量

6.高靈敏度

采用歐司朗高靈敏度，高信噪比光電二極管對(duì)微弱輻射熒光信號(hào)進(jìn)行采集，為熒光檢測提供更高的靈敏度

7.激發(fā)采集波段靈活可變

標(biāo)配四色熒光，熒光波段可根據(jù)客戶需求進(jìn)行選擇，光譜波段更靈活，更好地匹配各廠家的熒光染料與探針

非洲豬瘟檢測儀操作步驟：

1、病毒DNA的提?。ㄊ褂肁盒）

（1）待檢樣品、陽性對(duì)照和陰性對(duì)照的份數(shù)總和用n表示，取n個(gè)滅菌的1.5 mL離心管，逐管編號(hào)。

（2）每管加入BufferA500mL。

（3）每管分別加入已處理的待檢樣品、陽性對(duì)照、陰性對(duì)照各200mL，充分混勻，室溫放置10分鐘。

（4）取與上述離心管等量的DNase-Free吸附柱和收集管，編號(hào)。將離心管中的溶液轉(zhuǎn)移至DNase-Free吸附柱，（為避免堵塞吸附柱，盡量不要吸懸浮雜質(zhì)）。

（5）用高速離心機(jī)設(shè)置13000 r/min室溫離心30秒。

（6）棄去收集管液體，將吸附柱放回收集管中。

（7）吸附柱內(nèi)加入600 μL Buffer B，13000 r/min離心30秒。

（8）棄去收集管液體，將吸附柱放回收集管中。

（9）重復(fù)步驟（7），（8）。

（10）13000 r/min空柱離心2分鐘，去除殘留液。

（11）將每個(gè)吸附柱分別移入新的1.5mL離心管中，向柱中央加入50μL Buffer C，室溫靜置1分鐘，13000 r/min離心30秒，離心管中液體即為模板DNA。獲得的DNA溶液，冰上保存?zhèn)溆茫ㄗ⒁馓崛〉腄NA須在2h內(nèi)進(jìn)行PCR擴(kuò)增，若需長期保存須放置-80℃冰箱，但應(yīng)避免反復(fù)凍融）。

2、熒光PCR擴(kuò)增（使用B盒）

（1）從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液、Taq酶，室溫融化后，2 000 r/min離心5秒。設(shè)所需PCR管數(shù)為n（n = 樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽性對(duì)照），每個(gè)測試反應(yīng)體系需要20 μL 熒光PCR反應(yīng)液和0.5 μL Taq酶。計(jì)算好各試劑的使用量，加入一適當(dāng)體積小管中，充分混合均勻后，向每個(gè)PCR管中各分裝20μL。

（2）分別向上述PCR管中加入（11）中制備的DNA溶液各5μL，蓋緊管蓋，500 r/min 離心30秒。

（3）將加樣后的PCR管放入熒光PCR檢測儀內(nèi)，作好標(biāo)記。反應(yīng)參數(shù)設(shè)置：

第一階段，預(yù)變性95℃/3分鐘

第二階段，95℃/15秒，52℃/10秒，60℃/35秒共45個(gè)循環(huán)。熒光收集在第二階段每次循環(huán)的60℃延伸時(shí)進(jìn)行。